关于蜡样芽孢杆菌呕吐毒素

蜡样芽孢杆菌呕吐毒素由蜡样芽孢杆菌产生，具有极强的热稳定性和毒性，常规消毒无效，一旦摄入，可导致急性呕吐、腹泻，甚至更严重的胃肠道反应，尤其对免疫力尚不完善的婴幼儿而言，危害更甚。

传统上通过限制蜡样芽孢杆菌的菌落数来间接管控呕吐毒素风险，耗时长，灵敏度低，无法满足快速筛查需求。而LC-MS/MS技术能通过分子离子碎片，精准锁定毒素的存在。

如何检测？

• 分子量1171，极性大，易“淹没”在奶粉蛋白脂肪里

• 加1 g样，目标物仅0.5 ng，痕量目标物在海量基质中高度稀释

• 传统C18柱回收率＜60 %，重现性差

基于中国卫生监督协会团体标准T/WSJD 57-2024，我们优化并建立了婴儿配方奶粉中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素的液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）测定方法。这一方法采用岛津SHIMSEN Styra HLB固相萃取柱进行样品净化、Shim-pack Scepter C18-300色谱柱实现高效分离，并借助LC-MS/MS串联质谱仪进行高灵敏度检测。

岛津方案

▶ 前处理步骤：

称1 g奶粉→加乙腈涡旋→超声30 min→离心→HLB固相萃取（甲醇/水活化→上样→水洗→80 %甲醇淋洗→9+1乙腈-甲醇洗脱）→40 ℃氮吹→1 mL乙腈复溶→0.22 µm滤膜→上机

样品净化流程图

▶ 关键参数：

色谱柱：Shim-pack Scepter C18-300（1.9 μm，2.1×100 mm）

流速：0.35 mL/min

柱温：40 ℃

流动相：A：0.1%甲酸-2 mmol 乙酸铵水溶液

B：0.1 %甲酸乙腈溶液

进样量：5 μL

梯度洗脱程序：

离子化模式：ESI，正离子扫描

MRM参数：

▶ 典型实验数据：

蜡样芽孢杆菌呕吐毒素0.1 ng/mL响应情况

优势

相比传统方法，本方案操作简便、前处理耗时短、灵敏度高（检出限低至0.1 µg/kg以下），轻松应对复杂基质中痕量毒素的检测。

参考耗材

色谱柱：Shim-pack Scepter C18-300（1.9 μm，2.1×100 mm）

P/N：227-31203-05

固相萃取小柱：SHIMSEN Styra HLB（200 mg/6 mL） 

P/N：380-00855-10

SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器

P/N：380-00341

LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial

P/N：227-34001-01

本文内容非商业广告，仅供专业人士参考。