液质联用仪使用经验(教训)交流总结

1.液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2008-03-07 14:58mass
总结坛子里的转: 一般规律: 一、 做液质,加离子诱导剂得是挥发性的,生物碱用甲酸或乙酸 二、 我认为要维护好仪器, 首先流速不能过大,液质是不能承载过大流速的; 其次电压不要加到极限,尤其是正负离子转换时要适当调整; 最后是做完样一定要及时冲洗和吹扫管路。 注意:[color=Blue]做液质时跑一针的时间最好不要超过45分钟,否则仪器会很累。[/color] 回复[quote][color=Blue]做液质时跑一针的时间最好不要超过45分钟,否则仪器会很累[/quote]:[/color] 评价1:45 分钟的LC-MS,MS一定是受不了的。一般的LC-MS Full Scan分析可以在30分钟内,做一般的定量,比较好的在15分钟内, 如果要做High throughout可以在3-5分钟内。 评价2:我用的液质是菲尼根的,刚用很多东西不知道。大家都说分析样品不能超过45分钟是什么意思啊?我做中药有时候一针就1个小时,还运行的序列啊。 评价3:是啊,我也不太明白,我用了一年多,是岛津的MS2010EV,单四级杆的,在上面完成了三个农残试验项目的检测,加起来总共走了三千来个样了,每针虽然只有十几分钟,可序列运行下来,每次也要十几二十小时呢,这样操作不行吗,也不知道有没地方可以培训?或者可以像气质那样设定溶剂延迟时间,只在目标物出峰的时候,再打开质谱呢?好想有人教教啊,在此先谢谢了。 三、 LC和MS的条件优化是成功的关键。 四、 1、由于液质的流速较小(ESI一般为0.2ml/min),所以配置样品的溶剂强度不能太大,尽量小于起始比例,否则,会出现保留时间偏移等问题。 2、如果在液相上摸好的条件,注意尤其是流动相的组成要转化成合适LCMS分析的。 3、磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵塞毛细管等,要更换成可挥发的有机缓冲盐。 4、缓冲盐会导致离子抑制,因此要控制缓冲液的强度,<10mM。 5、去污剂、表面活性剂会有离子抑制现象发生, 表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据,因此作液质联用仪时,不要使用洗涤剂清洗玻璃器皿等容器,如果一定要用,建议超声清洗多次。 五、 要做好质谱的维护工作,就得从小处着手。比如分析的样品必须要干净,这样既可以保护色谱柱,也可以防止污染质谱;分析了大量的生物样品后,冲洗系统时,先用高比例的水相冲洗,把源也给洗一下,然后再换用高比例的有机相,这时要把柱后管路从源上拿下来,避免柱中的杂质给冲进质谱……细节很多很多,大家在日常应用中尽量注意和避免就可以了。 六、 做液质三年了,岛津、waters、ABI和finigan的都摸过,经验谈不上,说点自己的注意点吧。 1.前处理:样品一定要干净,不管是为了质谱还是为了保护柱子,生物样品提取的好些,如果直接沉淀,一定要注意,尽量高转速12000rpm以上,低温离心,最好离2次(保险一点),转移样品也要仔细,从中间慢慢吸,有时会有漂浮物,岛津的质谱好像做直接沉淀的源比较容易堵,Waters的好些。 2.样品浓度:质谱是灵敏度很高的仪器,进样浓度一定不能太高,1-2ug/ml已经可以啦,太高的浓度对仪器来说比较容易造成残留,而且定量也会不准啦。 3.流动相:流动相中尽量加易挥发的盐,尽量不要加表面活性剂之类的,容易离子抑制,如果遇到离子抑制,可以试试把你的样品峰往后推推或者改变提取方法,也可以试试用APCI源。如果你的液相是低压混合的,尽量不要跑梯度,那样很费时间,如果没办法,一针又要走很长时间的话,可以考虑切换,只测样品出峰前后的那段时间,这样可以保护质谱。但是如果你用粗柱子,较高流速的也可以考虑跑梯度,如API4000,但要尽量减小死体积。 4.冲洗:冲柱子自然不用说了,低有机相和高有机相分别冲一定时间(各至少半个小时以上吧),柱子保存在高有机相中。做完试验,冲源也是很重要的,也是低有机相和高有机相冲,但是时间可以不用那么长,你可以先冲源再冲柱子,或者两者分开冲,个人觉得分开冲好些,这样柱子上的脏东西就不会进到源里面去啦。冲源的时候气可以关小些。 七、 1、样品必须过0.22um滤膜过滤,不得有颗粒物; 2、上样的溶剂,必须是色谱纯,最好和你的流动相比例一致; 3、反相体系,不允许用正己烷之类极性弱的溶剂溶解样品并上样。 4、水,自然是纯净水了; 5、样品不允许含有金属离子、表面活性剂(不要用洗洁精洗瓶子)、磷酸盐、硼酸盐等不挥发盐; 6、淋洗液缓冲溶剂必须用可挥发的,如乙酸、乙酸铵、氢氧化四丁基铵等,色谱纯级别。 7、样品pH5~7严禁含有无机或有机强酸强碱。 8、六通阀处变三通,最好把没有信号的区域,切换到废液,这样减少源的污染 9、定期振气、清洗离子源,换油

2.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2009-09-17 17:41huihuidetian112
谢谢楼主朋友经验交流!学习了!:)

3.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2009-09-09 15:36eesa_dc_seein
感谢共享!资料非常有用! :D

4.很实用很好的总结,好好学习一下了

2009-06-01 18:03苦行僧
首先感谢楼上各位的经验交流,学习到很多知识。我们公司是现在有 waters的液质联用,岛津的液相,瓦里安的原子吸收和气相,但是我学习这些仪器时间不长所以经常会遇到各种各样的问题,相信大家也会在实际分析中遇到各种问题。而且很多问题都不是上面高手的说的,所以我创建了一个QQ群,希望大家用这些仪器的能加入进来共同讨论我们实际情况遇到的问题。共同学习,共同成长! QQ群74160628 有时间大家可以在线交流学习,及时解决我们遇到的问题!

5.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2008-08-06 17:02mylying
我刚刚接触液质,对您说的方法有许多不解,还请您多指教。 您说“如果遇到离子抑制,可以试试把你的样品峰往后推推或者改变提取方法”怎样把样品峰往后退? 还有“如果你的液相是低压混合的,尽量不要跑梯度,那样很费时间,如果没办法,一针又要走很长时间的话,可以考虑切换,只测样品出峰前后的那段时间,这样可以保护质谱。但是如果你用粗柱子,较高流速的也可以考虑跑梯度,如API4000,但要尽量减小死体积。”为什么不能跑梯度?切换是不是只用三通接在质谱前面?

6.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2008-08-03 17:48haipi
很实用,好好学习一下

7.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2008-07-10 22:12xulei1982
非常实用,收藏一下!

8.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2008-03-07 15:00mass
岛津用户 我用的是导津的2010MS,单四极杆的,一年了,还觉得是门外汉。质谱参数是安装工程师调谐得到的,不用改,看发表的论文上的参数也和我们一样,所以对参数的意义都不太确切知道,就象对紫外检测器一样,遇到不同的对象,改改波长,我们就改改选择离子的m/z而已,由于液相配置太低了,梯度走不了,只能做单残留,还觉得挺好用的。

9.回复:液质联用仪使用经验(教训)交流总结

2008-03-07 15:00mass
waters用户 一、 我使用UPLC-Quattro Micro Mass有很长时间啦,在使用过程中强洗和弱洗不能搞混!我有一次配制强洗弱洗时,把比例给整反了。结果出来一看,内标的响应参差不齐,准确度和精密度极差,还好后来自己找出原因把问题也给解决了!所以希望各位用过液质的站友能够把自己使用仪器的经验和教训说出来,大家互相学习,互相借鉴,这样可以学的更快更好! 二、 那我说几点吧,我们这里用的是waters液质 1.用的所有试剂,仪器,均不得使用洗洁精。因为洗洁精在仪器内存留,而且洗不出来,就会富集,最总堵柱子,影响结果。 2.要求的试剂纯度较高,一般为色谱纯的,且过膜都为0.22um的 三、 我单位用的是quattro_micro的仪器,在使用过程中,由于我单位样品量大,进样针出现打针的情况,后来咨询多方专家,得知是由于进样瓶盖的重复利用造成的!现建议大家在分析样品时为了增加进样针寿命,经常检查瓶盖!(当然是在你单位重复使用瓶盖的前提下) [color=Blue]评价:[/color]对此我也有同感。我们的仪器最让人头疼的就是进样针总弯,除去人为因素(样品盘没放好,换样品盘没校针位)外,有时还会因为常时间不用,再次使用时自检就出错,弯了。再或者有时无任何症照就莫名其妙的弯了。真是娇贵!咨询工程师后认为可能是停机前流动相中有缓冲盐,没能很好的洗针。再就是上面所说的原因了,样品瓶盖的胶垫该换了。

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